Acronyme

Année

Laboratoire

Collaboration(s)

Budget

Durée

NanoCELL

2013

IEF

Laboratoire Charles Fabry ; LadHyX

66 k€

1 an

Titre

Etude de la mécanotransduction sur des cellules endothéliales vasculaires par FRET

Porteur

Date de démarrage

Juillet 2013

Présentation du projet

Le projet NanoCELL vise à étudier la mécanotransduction sur des cellules endothéliales vasculaires, et donc expliquer comment un signal mécanique reçu par une cellule endothéliale (CE) est converti en un signal biologique capable de moduler la réponse cellulaire. Des travaux menés au LadHyX ont montré que la transmission des forces mécaniques s’effectue via les fibres de stress (rassemblement de filaments d’actine). Les modèles théoriques du LadHyX montrent que la dynamique est lente ou rapide suivant l’angle d’application de la force.

L’objectif du projet NanoCELL est de vérifier d’un point de vue expérimental ces prédictions. Il vise notamment à :

• Contrôler l’organisation du cytosquelette d’actine dans les CE
• Appliquer des forces contrôlées en amplitude et en direction à la surface des CE
• Valider la mécanique de transmission rapide par FRET

Résultats

Il a été possible de contrôler et quantifier, de façon reproductible, l’organisation du cytosquelette d’actine sur des surfaces microstructurées. Sur ces structures en forme de barre, les fibres de stress s’organisent à la périphérie de la cellule.

Concernant l’application des forces contrôlées en amplitude et en direction à la surface des CE, les expériences ont nécessité le développement de pinces optiques. Le piège développé a été calibré et est mobile dans 2 directions. Les expériences sont en cours d’analyse afin de vérifier la reproductibilité des résultats.

Enfin, pour valider les modèles de transmission des forces, les partenaires ont suivi par analyse FRET la protéine Src, activée lors des phénomènes de mécano-transduction. Des optimisations ont été nécessaires pour s’affranchir des problèmes de photoblanchissement. Les expériences sont toujours en cours.

Publication(s)

En cours

Suite du projet

Une pré-proposition a été déposée à l’ANR (2014) et est en cours d’évaluation